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果膠的理化性質(zhì)

2022.6.07

由于原料的種類、生長期、采割期、保存時間及提取方法等因素的影響, 果膠的自身組成和理化性質(zhì)有很大的差異, 所以對果膠理化性質(zhì)的測定對于果膠的表征及質(zhì)量判定具有非常重要的意義。 果膠的理化性質(zhì)主要有溶解性、 酯化度(Degree of Esterfication,DE)、Gal-A含量(半乳糖醛酸)、單糖組成、相對分子質(zhì)量(Molecular Weight,Mw)、流變及凝膠特性,其中決定果膠的應(yīng)用范圍和經(jīng)濟價值,評價果膠品質(zhì)的3個較重要的參數(shù)為DE、膠凝度和Gal-A含量。?

溶解性

根據(jù)果膠的溶解性將其分為水溶性果膠和水不溶性果膠。 果膠的溶解性與果膠的聚合度和其甲氧基的含量和分布有關(guān)。 雖然果膠溶液的pH、溫度以及濃度對果膠的溶解性也有一定的影響,但一般來說,果膠的相對分子質(zhì)量越小,酯化度越高,其溶解性越好。類似于親水膠體,果膠顆粒是先溶脹再溶解。如果果膠顆粒分散于水中時沒有很好地分離,溶脹的顆粒就會相互聚結(jié)成大塊狀,而此大塊一旦形成就很難溶解。?

酯化度

果膠是一類聚半乳糖醛酸多糖, 其半乳糖醛酸殘基往往被一些基團酯化,如甲氧基、酰胺基等。酯化度又稱甲氧基化,指果膠中甲酯化、乙?;王0坊壤目偤?。 根據(jù)果膠酯化度以及酯化種類的差異,可將果膠分為3類:高酯果膠(DE>50%)、低酯果膠(DE<50%)、酰胺化果膠(酰胺化度>25%)。果膠的酯化度通常因原料的多樣性和提取工藝的不同而不同。

果膠的DE是一個非常重要的參數(shù)。 DE的大小和種類影響著果膠產(chǎn)品的溶解性、 凝膠性以及乳化穩(wěn)定性。 如在不考慮其它因素的條件下,果膠的酯化度越高,其水溶性越好;果膠的酰胺化度越高,果膠的水溶性也越好。 此外,酯化度還影響藥物的釋放水平,例如目前普遍認為的具有抗癌活性的MCP的酯化度需在10%以下。

果膠DE一般采用滴定法測定,此法較為簡單易行,但消耗樣品量大且步驟繁瑣。 此外,還有拉曼光譜法、紅外法、核磁共振波譜法和高效液相色譜法等,其中紅外法所需樣品量少且不破壞樣品,簡便、快速,但結(jié)果誤差較大。 測定結(jié)果最為準確的是核磁共振波譜法, 但此法要求高純度的樣品。

單糖組成及含量

果膠是一類以聚半乳糖醛酸為主的雜多糖,商業(yè)化的果膠中Gal-A(半乳糖醛酸)含量≥65%。 在許多文獻中, 通常以Gal-A含量來表示果膠純度,測定Gal-A含量大多采用硫酸咔唑法和間羥基聯(lián)苯法,離子色譜測定更為準確。 此外還有重量法、果膠酸鈣滴定法和蒸餾滴定法。 不同原料的果膠單糖組成差異較大。

單糖構(gòu)成可間接反映果膠結(jié)構(gòu), 在一些文獻中,通常以Gal-A(半乳糖醛酸)含量來表示果膠純度,果膠的中性糖大多在其側(cè)鏈中,因此Gal-A含量高;中性糖含量低的果膠,說明果膠中側(cè)鏈較少,反之說明果膠中側(cè)鏈含量較高。 目前,果膠單糖測定方法主要有高效陰離子交換色譜-脈沖安培檢測法(High Performance Anion-Exchange Chromatography with Pulsed Amperometric Detection,HPAEC-PAD)、蒸發(fā)光散射法(Evaporative Light Scatter-ing Detector,ELSD) 和氣液相色譜法 (Gas-Liquid Chromatography,GLC)。 與HPAEC-PAD和ELSD法相比 ,GLC法需對水解后的樣品進行衍生才能測定,步驟更為繁瑣,而衍生效果的好壞直接影響單糖含量的測定值。 常用HPAEC-PAD法測定果膠的單糖組成, 此法無需柱前或柱后衍生,靈敏度高,重現(xiàn)性好。

凝膠特性

膠凝度是衡量果膠質(zhì)量的主要指標(biāo)之一,指在一定條件下,每份果膠能與多少份固形物(通常為蔗糖和葡萄糖) 制成具有一定硬度和質(zhì)量的果凍的能力,即衡量果膠形成凝膠的能力大小。

膠凝度是工業(yè)上判斷果膠品質(zhì)好壞的一個重要參數(shù),主要采用US-SAG 法和壓力破碎法測定果膠膠凝度。 商業(yè)化果膠的膠凝度要求(US-SAG):高酯果膠(150度±5 度 )和低酯果膠(100 度±5 度)。 雖然果膠普遍存在于所有的高等植物中,許多科學(xué)家也嘗試利用甘薯、向日葵等原料來進行商業(yè)化生產(chǎn), 但目前國內(nèi)外的果膠生產(chǎn)商生產(chǎn)果膠的原料都是柑橘皮渣和蘋果皮, 其中一個關(guān)鍵的原因在于其它原料制備的果膠的膠凝度無法達到商業(yè)化的要求。

相對分子質(zhì)量

果膠的相對分子質(zhì)量介于50~300ku之間,不同原料和工藝提取到的果膠的相對分子質(zhì)量相差甚大。 凝膠法和高效體積排阻色譜法(High Performance Size Exclusion Chromatography,HPSEC)是測定果膠相對分子質(zhì)量的主要方法。HPSEC測定較為準確,且結(jié)果信息量大。 HPSEC 法能夠測定果膠的重均分子質(zhì)量(Mw) 和數(shù)均分子質(zhì)量(Number-average Molecular Weight,Mn)。 多聚分散性Mw/Mn表征分子質(zhì)量的分布寬度,Mw/Mn愈大,表明分子質(zhì)量分布越寬,反之則分子質(zhì)量分布范圍越窄。?

目前,將HPSEC與多角度激光光散射檢測器(Multi-angle Laser Light Scattering,MALLS)和示差折光檢測器 (Refractive Index Detection,RI)串聯(lián)來表征果膠的絕對分子質(zhì)量較為廣泛。 HPSEC-MALLS-RI 聯(lián)用技術(shù)的優(yōu)點是通過MALLS和RI兩種檢測器的數(shù)據(jù)直接測出樣品圖譜中每個點的絕對分子質(zhì)量,無需進行任何色譜柱標(biāo)定和標(biāo)準品參考。 這種方法特別適合于難以獲得標(biāo)準品的果膠大分子結(jié)構(gòu)的測定。

流變性質(zhì)

果膠的流變特性是果膠應(yīng)用過程中極為重要的問題。與其它植物膠相比,果膠溶液的黏度較低。果膠稀溶液的流動特性近似牛頓型流體,而高濃度(1%)的果膠溶液具有假塑性流體的一些現(xiàn)象和特性。

和其他的生物高聚物分散體一樣, 高濃度的果膠溶液中特性黏度和剪切速率的關(guān)系表現(xiàn)為 3個階段:(1)在 0 剪切速率下表現(xiàn)為一牛頓流體的性質(zhì),黏度為一常數(shù);(2)當(dāng)?shù)竭_低剪切速率的某個點時,溶液開始呈現(xiàn)剪切稀化的現(xiàn)象,黏度以冪次方下降;(3)在高剪切速率下,溶液的黏度達到一極限,并且為一無限剪切常數(shù)黏度。

出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因目前認為是剪切速率使果膠的構(gòu)象發(fā)生變化, 果膠分子的構(gòu)象在不同剪切速率下發(fā)生重排。 在第1階段,剪切速率非常低,聚合物鏈的重排較少,黏度變化很?。辉诘?階段,剪切速率的加快使得果膠分子構(gòu)象加速重排,宏觀表現(xiàn)為黏度以冪次方的速率下降;而在高剪切速率下的第3階段,由于剪切速率太快,果膠分子構(gòu)象來不及重排便使得黏度無限接近一常數(shù)。

影響果膠溶液黏度的因素很多,除了果膠的自身結(jié)構(gòu)特性(Mw、DE等)外,同時還受到外界條件,如所在溶液體系的狀態(tài)(濃度、溫度、pH值、鹽以及固形物含量等)和一些物理因素(攪拌、外加剪切等)的影響。 而果膠溶液流變性的好壞直接決定產(chǎn)品品質(zhì)的優(yōu)劣及食品加工工藝的設(shè)計。


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