液相色譜儀紫外檢測器工作原理、應(yīng)用及注意事項
?液相色譜儀紫外檢測器是應(yīng)用zui廣泛的一種檢測器，當(dāng)檢測波長范圍包括可見光時，又稱為紫外-可見光檢測器。紫外檢測器不僅靈敏度高、噪音低、線性范圍寬、有較好的選擇性，而且對環(huán)境溫度、流動相組成變化和流速波動不太敏感，因此可用于對光吸收小、消光系數(shù)低的物質(zhì)進(jìn)行微量分析。既可用于等度洗脫，也可用于梯度洗脫。由于紫外檢測器對流速和溫度均不敏感，又可用于制備液相色譜儀。但在使用液相色譜儀紫外檢測器時，要注意流動相中各種溶劑的紫外吸收截止波長，如果溶劑中含有吸光雜質(zhì)，則會提高背景噪音，降低靈敏度。大部分常見有機(jī)物質(zhì)和部分無機(jī)物質(zhì)都具有紫外或可見光吸收基團(tuán)，因而有較強(qiáng)的紫外或可見光吸收能力，因此UVD既有較高的靈敏度，也有很廣泛的應(yīng)用范圍，是液相色譜中應(yīng)用zui廣泛的檢測器。?
? ? 液相色譜儀紫外檢測器的工作原理是：當(dāng)一束單色光透過流動池時，若流動相不吸收光，則吸收度A與吸光組分的濃度C和流動池的光徑長度L成正比?？捎霉奖硎緸椋篈＝lg＝lg＝ECL（式中I0為入射光強(qiáng)度，I為透射光強(qiáng)度，T為透光率，E為吸收系數(shù)）。其依據(jù)是光吸收定律，從光源發(fā)出的光經(jīng)狹縫、濾光片、樣品池到光電培增管上，使束由于樣品濃度不同所引起光強(qiáng)的變化轉(zhuǎn)換成光電流的變化，此光電流經(jīng)放大器輸入到對數(shù)轉(zhuǎn)換器，使透光率T轉(zhuǎn)成A輸出。根據(jù)上式就知測出了A，就知樣品濃度C。若從放大器直接輸入記錄儀，繪出的是樣品透光率T變化的圖譜，若從對數(shù)轉(zhuǎn)換器輸入到記錄儀繪出的是樣品光密度A變化的圖譜。
? ??紫外檢測器分為固定波長檢測器、可變波長檢測器和光電二極管陣列檢測器。按光路系統(tǒng)來分，紫外檢測器可分為單光路和雙光路兩種?？勺儾ㄩL檢測器又可分單波長（單通道）檢測器和雙波長（雙通道）檢測器。PDAD是80年代出現(xiàn)的一種光學(xué)多通道檢測器，它可以對每個洗脫組分進(jìn)行光譜掃描，經(jīng)計算機(jī)處理后，得到光譜和色譜結(jié)合的三維圖譜。其中吸收光譜用于定性（確證是否是單一純物質(zhì)），色譜用于定量。常用于液相色譜儀對復(fù)雜樣品（如生物樣品、中草藥）的定性定量分析。
? ??在使用紫外檢測器分析檢測時需注意以下事項以保證檢測器的靈敏度：
? ? 1.氘燈的光強(qiáng)受溫度和電壓影響較大，魯創(chuàng)分析儀器公司建議在恒溫室內(nèi)工作或者在冰庫里工作；
? ? 2.T調(diào)零生產(chǎn)時機(jī)內(nèi)已校準(zhǔn)，當(dāng)更換光電培增管后，需重新校準(zhǔn)；
? ? 3.氘燈壽命可達(dá)數(shù)千小時，若發(fā)現(xiàn)記錄儀不能調(diào)到10mV，且基線一直往小的方向漂移要考慮換燈。如氘燈不亮可再按一次電源開關(guān)，氘燈就會即亮，光電培增管壽命在數(shù)千小時以上。
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