細菌的生化反應(yīng)檢測
不同細菌 ?由于所含的酶系統(tǒng)不完全相同，因而對營養(yǎng)物質(zhì)的分解能力及代謝產(chǎn)物亦不一致，據(jù)此，可用以鑒別細菌的種類。
一、單糖發(fā)酵試驗
【原理】
單糖發(fā)酵是將葡萄糖，乳糖或麥芽糖等分別加入蛋白胨水培養(yǎng)基內(nèi)，使其最終濃度為0.75~1％。并加入一定量酚紅指示劑及小倒管，制成單糖發(fā)酵管，接種細菌經(jīng)37℃培養(yǎng)18~24小時，若能分解糖產(chǎn)酸則酚紅指示劑由紅變黃，若能分解甲酸有CO2和H2等氣體形成，小倒管內(nèi)則聚集有氣泡；不分解，則指示劑不變色。
【材料】
1．菌種：大腸桿菌，傷寒桿菌18~24小時瓊脂 ?斜面培養(yǎng)物。
2．培養(yǎng)基：葡萄糖發(fā)酵管，乳糖發(fā)酵管等。
【方法】
1．將傷寒桿菌，大腸桿菌 ?按照液體接種方法分別接種于葡萄糖及乳糖發(fā)酵管內(nèi)。
2．置37℃孵箱培養(yǎng)18~24小時。
3．觀察結(jié)果：由于一些細菌能分解某種糖類產(chǎn)酸，所以培養(yǎng)基中PH下降到7.0以下，在酚紅指示劑的顯示下，培養(yǎng)基顏色由紅變黃。產(chǎn)酸者以“+”表示，如果同時產(chǎn)生氣體，則培養(yǎng)基中小倒管內(nèi)有氣泡出現(xiàn)，此乃產(chǎn)酸又產(chǎn)氣，以“⊕”表示，不分解，則指示劑不變色，用“-”表示。
【結(jié)果】
傷寒桿菌大腸桿菌
葡萄糖+⊕
乳 糖-⊕
二、V-P(Voges-Proskauer)試驗
【原理】
有些細菌如產(chǎn)氣桿菌，分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸脫羧，生成乙酰甲基甲醇，在堿性環(huán)境中被氧化為二乙酰，再與培養(yǎng)基內(nèi)胍基結(jié)合，生成紅色化合物，V—P試驗陽性。
【材料】
1．菌種：大腸桿菌，產(chǎn)氣桿菌18~24小時瓊脂斜面培養(yǎng)物。
2．培養(yǎng)基：葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基。
3．試劑：V-P試劑
