如何提高 hplc 理論塔板數(shù)
方法如下
可以改變以下條件：
1，實(shí)用適當(dāng)細(xì)粒度和顆粒度均勻的載體，并盡量填充均勻，是減少渦流擴(kuò)散、提高柱效的有效途徑 。
2，改變色譜柱的柱長(zhǎng)，因?yàn)樯V柱的塔板數(shù)一定時(shí)，色譜柱長(zhǎng)越短，虛擬塔板間距離越短，柱效越高。
理論塔板數(shù)
理論塔板數(shù)（theoretical plate number）N，色譜的柱效參數(shù)之一,用于定量表示色譜柱的分離效率（簡(jiǎn)稱柱效）。N取決于固定相的種類、性質(zhì)（粒度、粒徑分布等）、填充狀況、柱長(zhǎng)、流動(dòng)相的種類和流速及測(cè)定柱效所用物質(zhì)的性質(zhì)。如果峰形對(duì)稱并符合正態(tài)分布，N可近似表示為：
理論塔板數(shù)=5.54(保留時(shí)間/半高峰寬)2 (2是平方)
柱效率用理論塔板數(shù)定量地表示：N=16*（t/w ）2。其中，t是溶質(zhì)從進(jìn)樣到最大洗脫峰出現(xiàn)的時(shí)間，w為該溶質(zhì)的洗脫峰在基線處的寬度。在一色譜柱中用相同的洗脫條件時(shí)候，不同化合物的滯留時(shí)間與其洗脫峰寬度之比接近常數(shù)。因此理論塔板數(shù)大的色譜柱效率高。當(dāng)然，N的大小和柱子長(zhǎng)度有密切關(guān)系：理論塔板高度H=柱長(zhǎng)/N，用H可以衡量單位長(zhǎng)度的色譜柱的效率，H越小，則色譜柱效率越高。。。
N為常量時(shí)，W隨tR成正比例變化。在一張多組分色譜圖上，如果各組份含量相當(dāng)，則后洗脫的峰比前面的峰要逐漸加寬，峰高則逐漸降低。
用半峰寬計(jì)算理論塔板數(shù)比用峰寬計(jì)算更為方便和常用，因?yàn)榘敕鍖捀菀诇?zhǔn)確測(cè)定，尤其是對(duì)稍有拖尾的峰。
N與柱長(zhǎng)成正比，柱越長(zhǎng)，N越大。用N表示柱效時(shí)應(yīng)注明柱長(zhǎng)，，如果未注明，則表示柱長(zhǎng)為1米時(shí)的理論塔板數(shù)。（一般HPLC柱的N在1000以上。）
若用調(diào)整保留時(shí)間（tR’）計(jì)算理論塔板數(shù)，所得值稱為有效理論塔板數(shù)（N有效或Neff）=16(tR’/W)2
