三種發(fā)酵罐菌種鑒定方法具體步驟
三種發(fā)酵罐菌種鑒定方法具體步驟說明,三種實(shí)驗(yàn)分別為糖發(fā)酵、蛋白分解以及淀粉水解實(shí)驗(yàn)。
1.糖發(fā)酵試驗(yàn)
糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)是最常用的生化反應(yīng),在腸道細(xì)菌鑒定上尤為重要。絕大多數(shù)細(xì)菌都能利用糖類作為碳源和能源,但是它們在分解糖的能力上有很大差異,有些細(xì)菌能分解糖并產(chǎn)酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和氣體(如氫、甲烷、二氧化碳等);不克不及分解乳糖。不能分化乳糖;傷寒桿菌能分解葡萄糖產(chǎn)酸不打造氣,酸的制作生可以利用指示劑來斷定。有些細(xì)菌只制作酸不產(chǎn)氣。平庸變形桿菌分解葡萄糖制作酸制造氣,譬喻大腸桿菌能分解乳糖和葡萄糖制造酸并出產(chǎn)氣;在配制培養(yǎng)基時(shí)預(yù)先加入溴甲酚紫[pH5.2(黃色)—6.8(紫色)],當(dāng)發(fā)酵產(chǎn)酸時(shí),可使培養(yǎng)基由紫色變?yōu)辄S色。氣體的產(chǎn)生可由發(fā)酵管中倒置的德漢氏小管中有無氣泡來證明。
取不一定量的稀釋液注入生化剖斷管中,將接種后的斷定管放入?yún)捬豕拗校?4h后考查各管中液體色調(diào)變化及制作氣情況。充足氮?dú)夂蠓湃?7℃恒溫培育箱養(yǎng)育。詳細(xì)實(shí)驗(yàn)順序:將菌液進(jìn)行適當(dāng)濃縮,用無菌封口膜封口。
2.以后在無菌情況下,24h后各管別離進(jìn)行米倫氏反響、吲哚反響、黃色反響與坂口反響等。將接種后的斷定管放入?yún)捬豕拗?,發(fā)酵罐菌種卵白質(zhì)分化執(zhí)行:將菌液發(fā)展切當(dāng)濃縮,取定然量的濃縮液注入生化斷定管中,用無菌封口膜封口。充實(shí)氮?dú)夂蠓湃?7℃恒溫作育箱培養(yǎng)。
3.淀粉水解實(shí)驗(yàn):將菌液進(jìn)行適當(dāng)稀釋,之后在無菌環(huán)境下,取一定量的稀釋液注入生化鑒定管中,用無菌封口膜封口。將接種后的鑒定管放入?yún)捬豕拗?,充足氮?dú)夂蠓湃?7℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)。24h后于各管中加入適量盧戈氏碘液觀察淀粉的水解情況。