質(zhì)粒載體的篩選特征介紹
選擇質(zhì)粒載體的要素是要了解可用到的載體的特征和預(yù)測重組克隆所用于的實驗。
所有的質(zhì)粒載體都有三個共同的特征：一個復(fù)制子、一個選擇性標(biāo)志和一個克隆位點。復(fù)制子是含有DNA復(fù)制起始位點的一段DNA（ori），也包括表達由質(zhì)粒編碼的復(fù)制必需的RNA和蛋白質(zhì)的基因。選擇性標(biāo)志對于質(zhì)粒在細(xì)胞內(nèi)持續(xù)存在時必不可少的?？寺∥稽c是限制性內(nèi)切酶切割位點，外源性DNA可由此插入質(zhì)粒內(nèi)，而且并不影響質(zhì)粒的復(fù)制能力，或為宿主提供選擇性表型。
選擇性標(biāo)志：編碼抗生素抗性的基因?qū)|(zhì)粒載體來說是最普遍的細(xì)菌選擇性標(biāo)志（如pBR322）；主要的抗生素選擇基因有：氨芐青霉素，氯霉素，四環(huán)素和卡那霉素四種。轉(zhuǎn)化的宿主菌一般都是抗生素敏感型的，獲得質(zhì)粒后，它能在有抗生素的平板上生長，從而達到篩選的要求。另一個顯性的選擇標(biāo)志就是對λ噬菌體感染的免疫（也就是λ阻抑物）。有時也會用的一些隱性標(biāo)志，如leuB-（亮氨酸存在時就不能生長）。
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