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如何查找質(zhì)粒圖譜

2019.8.13

方法一:使用Vector NT 軟件

做分子實(shí)驗(yàn),經(jīng)常和不同的質(zhì)粒打交道,了解各種質(zhì)粒的圖譜信息是必需的,invitrogen公司的這款軟件絕對是分子生物學(xué)蟲子們的福音,要想對質(zhì)粒圖譜了解更直觀,安裝這款軟件是非常必要的。這款軟件的軟件包里面會包括invitrogen公司的所有質(zhì)粒圖譜信息和其他比較常見和經(jīng)典的質(zhì)粒圖譜。


方法二:查找質(zhì)粒圖譜的網(wǎng)站

1. ?Vector Database(addgene)

這個(gè)網(wǎng)站很頁面很人性化,以前叫做lablife,現(xiàn)在網(wǎng)站做了整合,傳送http://www.91bio.com/carriers-website-to-find/),比如查找pRS類質(zhì)粒圖譜(注意,是一類質(zhì)粒圖譜,沒關(guān)系,照樣能找到),直接在搜索框輸入pRS,可以看到,之類質(zhì)粒一共有三十多個(gè)。

找到自己需要的質(zhì)粒名稱,點(diǎn)擊進(jìn)入,就可以看到質(zhì)粒圖譜了。



拿第一個(gè)質(zhì)粒pRS413舉例,如上圖,質(zhì)粒圖譜是不是很難看,對,我也覺得很難看,沒關(guān)系,看見view sequence了嗎?點(diǎn)擊進(jìn)入,我們就得到該質(zhì)粒圖譜的序列了。





如何得到比較好看的質(zhì)粒圖譜呢,看到GeneBank了嗎?對,熟悉vector的童鞋們肯定知道該如何做了,對,點(diǎn)擊進(jìn)入,如下圖,復(fù)制所有的代碼部分,新建txt文件,粘貼上代碼后,將文件擴(kuò)展名由txt更改為gb格式,導(dǎo)入vector,你就可以在vector里面看到質(zhì)粒圖譜了。




因?yàn)檫@個(gè)網(wǎng)站我經(jīng)常用,并且和NCBI網(wǎng)站的運(yùn)用方式一樣,以及和Vector軟件的配合使用,因此講解比較啰嗦。

2.Vector DB

此網(wǎng)站頁面比較簡陋,但分類比較直觀,總結(jié)和分類都比較完整。基本包括了所有表達(dá)系統(tǒng)的質(zhì)粒信息。



不過唯一有一點(diǎn)不爽的就是,這個(gè)網(wǎng)站竟然沒有搜索欄啊,太不人性化了。那如何在那么多質(zhì)粒信息中查找到我們所需要的質(zhì)粒的信息呢?沒關(guān)系,我們有網(wǎng)頁字符查找功能,見紅色標(biāo)記部分。

方法是:網(wǎng)頁工具欄 編輯——–在此頁上查找,然后輸入你的質(zhì)粒名稱,就可以了。比如:我們輸入pRS,是不是就和搜索欄一樣出現(xiàn)有用信息了?




點(diǎn)擊我們需要的質(zhì)粒進(jìn)入下以頁面,以質(zhì)粒pRS303為例,如下圖。有用信息除了對該質(zhì)粒進(jìn)行的一些描述性語言外,最重要的要算是紅色標(biāo)記部分了,sequence link進(jìn)入是該質(zhì)粒的序列。NCBI link,點(diǎn)擊直接進(jìn)入了NCBI,如何在NCBI中得到質(zhì)粒圖譜,下面將進(jìn)行詳細(xì)解釋。


3. ?NCBI

重點(diǎn)介紹如何用NCBI查找質(zhì)粒圖譜信息。如下圖,search下拉框中選中Nucleotide,搜索欄輸入質(zhì)粒名稱,拿pRS303舉例:

search后,得到搜索結(jié)果,如下圖,點(diǎn)擊右邊的send to,選中file,genebank等選項(xiàng),點(diǎn)擊Create File選項(xiàng),得到一個(gè)gb格式的文件,導(dǎo)入vector軟件中,就得到了我們需要的質(zhì)粒圖譜了。


4. ?Google及Google學(xué)術(shù)

Google確實(shí)是個(gè)好東西,學(xué)生物的應(yīng)該好好的學(xué)習(xí)下他的用法,雖然對于墻內(nèi)有時(shí)總提示無法打開,但搜索的效率是某娘不能比的,更不要提那個(gè)小三了。

檢索式子:質(zhì)粒名 + map

質(zhì)粒名 +sequence +filetype:txt or filetype:pdf

或者:進(jìn)入google,點(diǎn)擊”圖片搜索”,直接查找圖譜。

5. ?寒梅礪劍閣(熱心生物人整理的)

6. ?其他的一些核酸數(shù)據(jù)庫

方法三:一些重要試劑公司網(wǎng)頁

其實(shí)也是一些網(wǎng)站,因?yàn)檫@些網(wǎng)站除了得到質(zhì)粒圖譜等信息,還可以得到關(guān)于質(zhì)粒使用方面的信息,因此單獨(dú)拿出來做一個(gè)分類?,F(xiàn)在很多質(zhì)粒,特別是應(yīng)用比較廣泛的質(zhì)粒都一些公司商業(yè)化的質(zhì)粒,基本是由一個(gè)質(zhì)粒你就會聯(lián)想到一個(gè)公司的名字。

比如簡單的,克隆載體pMD18-T,TaKaRa,有木有;pGM-T,天根,有木有;

一些表達(dá)載體,使用最廣泛的,pET系列,Novagen公司(默克)的;有雙MCS的Duet系列載體,Novagen的;畢赤酵母表達(dá)質(zhì)粒pPIC3.5k,pPIC9k,pPICZA,pPICZaA等等,都是invitrogen的;另外一些pYES釀酒酵母表達(dá)系統(tǒng),也是invitrogen的,因此知道常見的質(zhì)粒是哪個(gè)公司的,去他們公司網(wǎng)站上肯定可以找到該質(zhì)粒的相關(guān)信息。



在他們公司主頁搜索欄直接搜索質(zhì)粒名稱,得到質(zhì)粒序列,圖譜什么的都不成問題,而且可以下到表達(dá)系統(tǒng)操作手冊,原核表達(dá)看完pET表達(dá)系統(tǒng)操作手冊,真核系統(tǒng)看完畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)。

方法四:如何查找經(jīng)過改造過的質(zhì)粒的質(zhì)粒圖譜

有些質(zhì)粒是經(jīng)過改造的,所以通過上述方法不能查詢到相應(yīng)信息。這時(shí),可以在google scholar中輸入質(zhì)粒名稱,可以直觀地看哪些學(xué)者在何文章中使用了該質(zhì)粒,從而可了解到質(zhì)粒的來源;或者籍此向作者咨詢或索取。

另外介紹下如何通過文獻(xiàn)查找經(jīng)過改造的質(zhì)粒的圖譜信息,

Kuhlman, T. E. and E. C. Cox (2010). “☆Site-specific chromosomal integration of large synthetic constructs.” Nucleic Acids Res 38(6): e92.

這篇文獻(xiàn),介紹了一種大腸桿菌染色體整合的方法,文中介紹了三個(gè)質(zhì)粒,是由作者自己改造了,如何查找到這三個(gè)質(zhì)粒圖譜了呢?

首先在PubMed中搜索到該文獻(xiàn),如下圖。



很多人,找到文獻(xiàn),僅僅將文獻(xiàn)下載下來就OK了,其實(shí)還有很多有用的信息,比如文章的supplementary,還有如上圖右邊的標(biāo)記部分,Nucleotide,protein都是一些很重要的信息。點(diǎn)擊右邊的Nucleotide,進(jìn)入如下頁面,看,文中涉及到的六個(gè)質(zhì)粒序列全都有,點(diǎn)擊進(jìn)入,按照方法二中,NCBI下載質(zhì)粒圖譜的方法就可以得到這幾個(gè)質(zhì)粒的圖譜,當(dāng)然,前提是該文章的作者已將載體信息上傳了NCBI。



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