亞細(xì)胞定位的GFP融合蛋白表達(dá)法
GFP是綠色熒光蛋白,在掃描共聚焦顯微鏡的激光照射下會(huì)發(fā)出綠色熒光,從而可以精確地定位蛋白質(zhì)的位置。綠色螢光蛋白(GFP)是一個(gè)由約238個(gè)氨基酸組成的蛋白質(zhì),從藍(lán)光到紫外線都能使其激發(fā),發(fā)出綠色熒光。通過基因工程技術(shù),綠色螢光蛋白(GFP)基因能轉(zhuǎn)進(jìn)不同物種的基因組,在后代中持續(xù)表達(dá),并且能根據(jù)啟動(dòng)子特異性地表達(dá)。
使用GFP必須構(gòu)建融合蛋白載體,并在轉(zhuǎn)染之后有效表達(dá)。這樣,若在熒光顯微鏡下看到細(xì)胞內(nèi)某一部位存在GFP信號(hào),說明和GFP融合的蛋白也存在于該部位,這樣就達(dá)到了確定某物質(zhì)亞細(xì)胞定位的目的。
推薦
熱點(diǎn)排行
一周推薦