生物載體的功能介紹
(1)為外源基因提供進(jìn)入受體細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力。從理論上講,任何DNA分子均可以物理滲透的方式進(jìn)入生物細(xì)胞中,但這種頻率極低,以至于在常規(guī)的實(shí)驗(yàn)中難以檢測(cè)到。某些種類的載體DNA分子本身具有高效轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞的特殊生物學(xué)效應(yīng),因此由外源基因與載體拼接所形成的DNA重組分子轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞的概率比外源DNA片段單獨(dú)轉(zhuǎn)化要高幾個(gè)數(shù)量級(jí)。
(2)為外源基因提供在受體細(xì)胞中的復(fù)制能力或整合能力。外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞后面臨兩種選擇,或者直接整合在受體細(xì)胞染色體DNA的某個(gè)區(qū)域內(nèi),作為其一部分復(fù)制并遺傳,或者獨(dú)立于受體細(xì)胞染色體DNA而存在,在后一種情況下,載體DNA分子必須為外源基因提供獨(dú)立的復(fù)制功能,否則外源基因不可能在受體細(xì)胞中復(fù)制和遺傳。
(3)為外源基因提供在受體細(xì)胞中的擴(kuò)增和表達(dá)能力。外源基因的擴(kuò)增依賴于載體分子在受體細(xì)胞中高拷貝自主復(fù)制的能力,這種能力通常由載體DNA上的若干相關(guān)基因編碼。同時(shí),外源基因高效表達(dá)所需的調(diào)控元件一般也由載體分子提供。
應(yīng)當(dāng)指出的是,上述三大功能并非所有的載體分子都必須具備,DNA重組克隆的目的不同,對(duì)載體分子的性能要求也不同。但對(duì)于所有不同用途的載體而言,為外源基因提供復(fù)制或整合能力是必不可少的,因此通常選擇生物體內(nèi)天然存在的質(zhì)粒以及噬菌體或病毒DNA作為載體藍(lán)本,并根據(jù)分子克隆的操作原理,對(duì)之進(jìn)行必要的修飾和改造,構(gòu)建出具有多種性能的載體DNA分子。
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焦點(diǎn)事件