手性HPLC峰面積怎么計(jì)算ee值
手性HPLC峰面積計(jì)算ee值:測(cè)定ee值不需要標(biāo)準(zhǔn)品的啊,只需要手性柱把兩個(gè)異構(gòu)體分開,然后兩個(gè)峰面積之差除以兩者峰面積之和即可。
首先用手性柱測(cè)試外消旋標(biāo)準(zhǔn)品,測(cè)試兩個(gè)對(duì)映異構(gòu)體的峰面積比例(一般1:1,也有不成1:1的)。根據(jù)這個(gè)比例測(cè)定樣品ee值。沒有標(biāo)準(zhǔn)品,做手性柱,出現(xiàn)兩個(gè)峰的峰面積之比就是ee值,不需要標(biāo)準(zhǔn)品,做HPLC是要標(biāo)準(zhǔn)品來做標(biāo)準(zhǔn)曲線的。
例如
一個(gè)化合物的比旋測(cè)得值為—16.3(c0.97,MeOH),又已知該化合物絕對(duì)純的比旋值為—17.9(c1.16,MeOH),那么這化合物的光學(xué)純度即e.e.值等于16.3/17.9×100%,為91%。如前所述,通過比旋的測(cè)定,得到的光學(xué)純度就是對(duì)映體過量的百分?jǐn)?shù),前提是在特定的條件下,用純的樣品小心地讀數(shù)。用旋光法測(cè)量的對(duì)映體過量值應(yīng)由另一個(gè)獨(dú)立的方法加以確認(rèn)。
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項(xiàng)目成果
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項(xiàng)目成果