熒光定量pcr的cdna濃度要求
1-100ng/ul(工作濃度)。
濃度太低和太好都會影響擴(kuò)增效率,但并不是絕對的。因?yàn)橛幸恍┗虮磉_(dá)水平極低,有一些在特殊情況下又極高。qPCR很多時(shí)候僅僅反映的是幾個樣品之間的趨勢,而不是絕對值。你先把cdna進(jìn)行梯度稀釋,然后進(jìn)行pcr,如果你的primer所擴(kuò)增的ct值在15-25之間,那么就是很不錯的稀釋梯度
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